ELISA试剂盒运用水浴或在将反应溶液参与至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地扫除“边缘效应"，并且可进步测定的重复性。 
呈现气泡则反应液界面有差异。
咱们在运用ELISA试剂盒96孔板的实验测定的时分，常发现有“边缘效应"，也便是外周孔显色较基地孔深。
经研讨证实在温育中的热力学梯度或许是根本原因之所。
有时分一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性，下次测定为阴性，往往便是上述加样及试剂的差错所形成的。
ELISA试剂盒实验聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃摆布）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与基地孔之间或许存在一热力学梯度。
还有便是在实验中，必然有运用微量加样器参与样本的过程。
太快的话无法确保微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易致使非特异吸附。溅起会对邻近孔发作污染。
运用时一定要根据自己的实验需求收购获取试剂盒，假设不是试剂盒，或许能提出RNA，但不能确保其质量以及完整性。
ELISA试剂盒提示留心：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅起和发作气泡。