大鼠肝星形细胞分离自正常大鼠肝脏组织,呈葡萄串状。肝星形细胞是肝脏*的间充质细胞,约占肝脏细胞总数的8%~13%。 作为肝脏合成细胞外基质的主要细胞群,肝星形细胞不仅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等细胞外基质成分,合成一定量的胶原酶以维持正常的基底膜结构,还能通过其突起的收缩参与肝窦的微循环调节。
此外,肝星形细胞能通过合成肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子、表皮生长因子等促进肝细胞增殖和肝再生。
大鼠肝星形细胞使用方法:
收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。
大鼠肝星形细胞注意事项:
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作
3. 传代培养过程中,消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态
4. 建议收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态。
5. 该细胞只可用于科研
备注:由于实验所用试剂与操作环境的不同,以上方法供各实验室参考。