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绵羊分泌型免疫球蛋白A(SIgA)酶联免疫方法
更新时间:2014-09-09   点击次数:1822次

绵羊分泌型免疫球蛋白A(SIgA)酶联免疫方法使用目的:

本试剂盒用于测定绵羊血清、血浆及相关液体样本中分泌型免疫球蛋白A(SIgA)含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中绵羊分泌型免疫球蛋白A(SIgA)水平。用纯化的绵羊分泌型免疫球蛋白A(SIgA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入分泌型免疫球蛋白A(SIgA),再与HRP标记的分泌型免疫球蛋白A(SIgA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的。颜色的深浅和样品中的分泌型免疫球蛋白A(SIgA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中绵羊分泌型免疫球蛋白A(SIgA)浓度。 

试剂盒组成 

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1瓶

7

终止液

6ml×1瓶

2

酶标试剂

6ml×1瓶

8

标准品(80μg/ml)

0.5ml×1瓶

3

酶标包被板

12孔×8条

9

标准品稀释液

1.5ml×1瓶

4

样品稀释液

6ml×1瓶

10

说明书

1份

5

显色剂A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2张  

6

显色剂B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1个

绵羊分泌型免疫球蛋白A(SIgA)酶联免疫方法标本要求 

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

40μg/ml

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

20μg/ml

4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

10μg/ml

3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

5μg/ml

2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

2.5μg/ml

1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 
温育:操作同3。
洗涤:操作同5。
显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转)。
测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

E-(Hu)(05)-02992 人白介素11(IL-11)ELISA检测试剂盒 ,英文名: IL-11 ELISA Kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-02993 人白介素10(IL-10)ELISA检测试剂盒 ,英文名: IL-10 ELISA Kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-02994 人白介素1(IL-1)ELISA检测试剂盒 ,英文名: IL-1 ELISA Kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-02995 人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA检测试剂盒 ,英文名: TR ELISA Kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-02996 人八聚体转录因子(OTF2B)ELISA检测试剂盒 ,英文名: OTF2B ELISA Kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-02997 人八聚体转录因子(OTF2A)ELISA检测试剂盒 ,英文名: OTF2A ELISA Kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-02998 人艾柯病毒IgM(ECHO IgM)ELISA检测试剂盒 ,英文名: ECHO IgM ELISA Kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-02999 人癌胚铁蛋白(CEF) ELISA检测试剂盒 ,英文名: CEF  ELISA Kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-03000 人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA检测试剂盒 ,英文名: CEA/CD66 ELISA Kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-03001 人阿立新A(Orexin A)ELISA检测试剂盒 ,英文名: Orexin A ELISA Kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-03002 人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA检测试剂盒 ,英文名: AGPs ELISA Kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-03003 人阿黑皮素原(POMC)ELISA检测试剂盒 ,绵羊分泌型免疫球蛋白A(SIgA)酶联免疫方法英文名: POMC ELISA Kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-03004 人阿黑皮素原(POMC)ELISA检测试剂盒 ,英文名: POMC ELISA Kit ,规格: 48T/96T

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