显微镜的物镜一般有低倍镜、高倍镜及油镜。病原生物学实验中zui常用者为油镜。
1.油镜的原理 使用油镜时需在玻片上滴加香柏油。由于从标本玻片上透过的光线,因介质密度不同,部分光线发生折射散失,使射入物镜光线减少(高倍镜孔径较大,影响不显著),因油镜的孔径较小,进入的光线则不够,致使物象显现不清。当在油镜与标本片之间加香柏油后,香柏油折射率(n=1.515)和玻璃的折射率(n=1.52),因此可增加进入透镜的光线,使视野亮度加强。
2. 在油镜头上常有下列几种标记:①放大倍数是90×或100/;若镜筒的长度不变,显微镜的放大倍数=目镜倍数乘以物镜的倍数。②镜头下缘有一白色线圈或黑色线圈;③刻有
“油"或外文“HI"、“Oel"、“Oil"等字样。④油镜头的长度大于低倍镜和高倍镜。
3. 使用方法
① 对光 转动转换器,将低倍镜镜头(4 倍、10 倍)转至载物台中央透光孔位置,打开透光光阑,对光,直至目镜中出现光线zui明亮、zui均匀的视场为止。显微镜的光源可分为内置光源和外置照明。内置光源:接通电源,按下底座的开关,电源打开即可。外置光源:将光圈放到zui大位置,在用眼睛观察目镜的同时,转动反光镜使其朝向光源(自然光或灯光),使视野中的光线zui明、均匀。如靠近光源,可用平面反光镜,如距光源较远,可用凹面反光镜。根据所观察的标本,升降集光器和缩放光圈,以获*光度。一般染色标本用油镜检查时,光度宜强,可将光圈开足,集光器上升至与载物台相平;检查未染色标本用低倍镜或高
倍镜观察时,应适当缩小光圈,下降集光器,使光度减弱。
② 装片 将标本片放置在工作台的夹持器中,用夹持起移动标本片至工作台开口中心(透光孔处)。
③ 调节焦距 通过旋转粗调焦手轮,将载物台升到zui高限定位置(制片不能触到物镜),此时已准备好调焦。使用4 倍或10 倍物镜,在目视目镜的同时,旋转粗调手轮,使工作台缓慢下降,在目视目镜中观察到的清晰的图像时,再调节光阑聚光镜孔,选择与物镜相匹配的孔,调节微调焦手轮,使视野中的图像zui清晰。用低倍镜找出标本的范围,然后提高镜筒,在标本的待检部位加一小滴香柏油,慢慢将油镜头浸于油中,但勿接触玻片。然后,自目镜处一面观察,一面微转动粗调节器,使镜筒徐徐上升,待看到模糊物象时,改用细调节器调至物象清晰。如果是滴片标本,先滴一滴标本在玻片上,轻轻盖上盖玻片。加盖玻片时,先将盖玻片的一边与在玻片上的水滴边缘接触,然后自一侧轻轻放下,先在低倍镜下观察,然后在高倍镜下观察,通过改变光圈的大小或转动细调焦手轮。
④ 还镜 观察完毕把镜头和载玻片上的油用3%擦净。将低倍镜转成八字型.降下聚光器, 转动粗调节器,使镜台下移,以免接物镜与集光器相碰受损。罩上镜套,放回原处。