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细胞培养基的清洗
更新时间:2015-06-07   点击次数:1328次

在组织培养过程中,离体细胞对任何毒性物质都十分敏感。毒性物质包括解体的微生物及细胞残余物以及非营养的化学物质,因此对新采用和重新使用的培养皿等培养用品都要严格清洗和消毒。
清洗步骤:按浸泡→刷洗→浸酸→冲洗等四步程序进行。
①浸泡:新购进的玻璃器皿常带有灰尘,呈弱碱性,或带有铅、碑等有害物质,故先用自来水浸泡过夜、水洗,然后再用2%~5%盐酸浸泡过夜或煮沸30min,水洗。要领:培养用后的玻璃器皿要立即泡入清水中,使下道刷洗工作能顺利进行。用后的玻璃器皿常带有大量的蛋白质附着,干涸后不易刷洗掉,用后要立即用清水浸泡。
②刷洗:用软毛刷、洗涤剂,刷去器皿上的杂质,冲洗晾干。要领:浸泡后的玻璃器皿用毛刷沾洗涤剂去器皿上的杂质、刷洗次太多,会损害器皿的表面光洁度,洗涤剂有使pH上升的趋势,所以易选用软毛刷和洗涤剂。禁止用去污粉。因其中含有砂粒。会严重破坏玻璃器皿的光洁度。特别注意刷洗瓶角部位。酸浸之前要把洗涤剂冲干净。
③浸酸:将器皿浸泡于清洁液24h,如急用也不得少于4h。清洁液由重铬酸钾、浓硫酸及蒸馏水配制而成,具有很强的氧化作用,去污能力很强。经清洁液浸泡后,玻璃器皿残留的末刷洗掉的微量杂质可被*清除。
④冲洗:先用自来水充分冲洗,吸管等冲流10min,瓶皿需每瓶灌满、倒掉,反复10次以上。然后再经蒸馏水漂洗3次,不留死角。晾干或烘干备用。对已用过的器皿,凡污染者必先经煮沸30min或放3%盐酸中浸泡过夜,未污染者可不需灭菌处理,但仍要刷洗、清洁液浸酸过夜,冲洗等。

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