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ELISA试剂盒与待测抗原含量呈负相关
更新时间:2016-06-12   点击次数:1218次

    根据检测目的和ELISA试剂盒操作步骤不同,有以下三种类型的常用方法:3.1间接法 此法是测定抗体zui常用的方法。将已知抗原吸附于固相载体。加人待检标本(含相应抗体)与之结合。洗涤后,加人酶标抗球蛋白抗体(酶标抗抗体)和底物进行测定。3.2双抗体夹心法 此法常用于测定抗原。

    将已知抗体吸附于固相载体,加人待检标本(含相应抗原)与之结合。温育后洗涤,加人酶标板中。3.3竞争法 此法可用于抗原和半抗原的定量测定,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,将ELISA试剂盒特异性抗体吸附于固相载体。加入待测抗原和一定量的酶标已知抗原,使二者竟争与固相抗体结合;经过洗涤分离,zui后结合于固相的酶标抗原。

    一、酶联免疫吸附法测定抗体含量(竞争法)1、仪器设备酶联免疫检测仪(Bio-550);酶标板 (96孔);微量注射器。2、试剂(1)HRP标记羊抗兔Ig G(1:1 000,国产);标准牛IgG;兔抗牛血清(1:256);(2)包被液:0.05mol/L pH9.6碳酸缓冲液,4℃,保存, Na2CO3 0.15g, NaHCO3 0.293g,蒸馏水稀释至100 mL。 (3)ELISA试剂盒稀释液与洗涤液:0.01mol/LpH7.4 PBS--Tween--20, 4℃,保存。NaCl 8g, KH2PO4 0.2g, Na2HPO4&12H2O 2.9g, Tween20,0.5mL。蒸馏水加至1000mL。

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