因此如何开展ELISA室内质控一直困扰着临床检测者。基于此,不同实验室采取了不同的应对措施,举例如下:①选择卫生部临床检验中心(NCCL)的低值质控血清作为室内质控品,储备量以3个月,采用一次超过2SD作为“告警”,一次超出3SD为“失控”的质控规则,(但该法对于HBeAb(4NCU/ml)、 HBcAb(2NCU/ml)检测不适用,因为即使质控在控,鸭ELISA试剂盒其结果也可能为阴性);②由于质控品不稳定,每个月需重新设立靶值 ,并根据常规CV设定SD(SD= ×CV¯);③阴阳性对照正常,室内弱阳性和阴性质控正常,且没有出现“花板”(洗板不干净,背景颜色深)的情况下认为该检测批有效,但仍需对位于“灰区”和弱阳性的HBsAg、HBeAg结果及少见模式结果进行复查,避免偶然因素及孔间差对结果造成影响;④若阴阳性对照、阴性质控异常,或出现“花板”的情况则必须整批复查;⑤在阴阳性对照、阴性质控正常且未出现“花板”的情况下,弱阳性质控S/Co超出-3SD时复查位于“灰区”标本,超出+3SD时则复查弱阳性标本;⑥对于抗体检测,尤其是竞争法检测HBeAb、HbcAb,由于不同试剂盒、鸭ELISA试剂盒不同检测方法间CO值存在差异及变异系数大等因素,结果缺乏可比性,失控后的处理很难满意地解决,在没有统一的判断标准、较小的变异系数及明确的临床意义的情况下,引入弱阳性报告方式在临床实践中证明可行;⑦室内质控的评价:认真分析每一次室内质控失控的原 因,并对各项检测的均值,CV等进行月与月之间的比较分析,及时发现试剂盒检出能力的变化及操作中存在的问题,并采取适当的措施来提高检测的性。
⑴室内质控品
室内质控品的稳定以及合适的浓度是运用一切质控规则的前提。可选择S/CO值减去精密度测定中得到的三倍批间CV%(通常的鸭ELISA试剂盒测定批间变异(CV%)在15%左右)与该S/CO值的乘积(意即三倍SD)仍大于1的质控血清作监测重复性的室内质控品用。 计算公式:S/CO(1-3CV%)=S/CO-3SD。同时选择S/CO处于1.5左右的质控血清以判断每次测定时试剂盒。
⑵ “即刻性”质控
一些实验室不是每天进行ELISA项目的检验,而ELSIA部分试剂盒效期短 ,用同一批号试剂盒连续常规测20次,难度较大。采用"即刻法"质控统计方法,只需连续测3次,即可对第3次检验结果进行质控。①先将测定值从小到大排列,X1zui小,Xnzui大 ;②计算X和s;③计算SI上限值和下限值。SI上=(Xzui小-X)/S,SI下=(Xzui大-X)/S;④对照SI表,检查是否出控。SI上、下限≤规定值,在控; SI上或下限>规定值,失控。