ELISA试剂盒的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。ELISA试剂盒在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色。
应用双抗体夹心法测定标本中人可溶性粘附分ELISA试剂盒水平。用纯化的人可溶性粘附分ELISA试剂盒抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入可溶性粘附分ELISA试剂盒，再与HRP标记的可溶性粘附分ELISA试剂盒抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的。颜色的深浅和样品中的可溶性粘附分ELISA试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人可溶性粘附分浓度。
