ELISA试剂盒准确的处理样本是确保ELISA查看的准确性和准确性的*步,下面就简略介绍一下不一样类型的样本的处理办法。
血清
血清是zui常用于ELISA查看的一类样本,处理也比较简略。
将上清分装多份,-20℃或-80℃保留,防止重复冻融。防止运用溶血或高血脂的标本。
常用的抗凝剂为EDTA、肝素钠和枸橼酸钠等,查看时还应细心阅读试剂盒说明书,查看试剂盒是不是对抗凝剂有特殊要求。
用无热原、无内毒素的试管或离心管收集血液标本,将试管或离心管室温放置2小时或4℃放置一晚,使血清分出。
4℃ 1000×g离心20分钟,细心收集上清。
一起也应防止细菌污染,由于菌体内可能富含内源性的HRP然后致使查看的假阳性。
一般咱们可用于ELISA查看的样本是有多种类型的,如血清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等,不一样类型的查看样本前期的处理办法是不一样的。
ELISA试剂盒血浆
用含抗凝剂的采血管或离心管收集血液标本,标本收集后30min内4℃ 1000×g离心15min,取上清即血浆。
为了确保查看的准确性,保留于-20℃或-80℃的样本在1~6个月内查看;
4℃保留的样本应在1周内进行查看。别的,还应确保样本不含NaN3,由于NaN3会抑制HRP的活性,然后致使假阴性的成果。
细胞培养上清
取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除掉细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保留,防止重复冻融。
尿液、唾液等别的液体生物样本
1000×g离心20min,取上清即可查看。
ELISA试验成功的条件是样本的准确处理加上试验途中准确的操作,准确的处理样本是确保ELISA查看的准确性和准确性的*步。
总的来说,由于ELISA只能查看可溶性蛋白的含量,所以应确保一切样本均为弄清的液体,沉积或悬浮物都应离心去掉。
建议将血清分装多份,-20℃或-80℃保留,防止重复冻融。
ELISA试剂盒采血过程中应防止溶血,由于红细胞裂解时会开释具有过氧化酶活性的物质,在以HRP为标记的ELISA查看中会有非特异性的显色,而致使查看的不准确性。