更新时间:2022-05-03
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T4 DNA聚合酶 | 9012-90-2
英文名称 : T4 DNA Polymerase
C A S : 9012-90-2
保 存 : -20℃
分子量 : 104kDa,单体
级 别 : BR
来 源 : 含有T4噬菌体克隆基因43的大肠杆菌
浓 度 : 5~10u/ul
活性定义 : 是指在37℃、30分钟内将10nmol脱氧核糖核苷酸掺入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量
酶活性分析混合物 : 67mM Tris-HCL(PH8.8), 1mM DTT, 6.7mM MgCL2, 16.7mM (NH4)2SO4, 0.2mg/ml BSA, 0.033mM各种dNTP,dGTP, 0.4MBq/ML(3H).-dTTP和0.2mM热变性和核酸酶处理的牛胸腺DNA
保存缓冲液组分 : 20mM 磷酸钾(PH7.5), 200mM KC1, 20mM DTT和50%(v/v)甘油
5×反应缓冲液 : 335mM Tris-HCL(PH8.8,25℃), 33mM MgCL2, 5mM DTT, 84mM (NH4)2SO4
抑制剂 : 金属螯合剂,核苷酸类似物2(p-n-butylanilino)-dATP、N2-(p-n-burylanilino)-dGTP、SH-封闭混合物
失 活 : 75℃加热10分钟
质量控制 : 测试表明无内切脱氧核糖核酸酶污染
性 状 : 悬浮液。重组酶,在模板及引物存在的条件下,T4 DNA聚合酶催化沿5'→3'方向DNA的合成。本酶还具有3'→5'外切核酸酶的活性,该活性比DNA聚合酶I强。T4 DNA聚合酶不像大肠杆菌DNA 聚合酶 I,不具有5'→3' 外切核酸酶的活性。
用 途 : 生化研究。3'突出末端平滑化;5'突出末端补平;单链删除后亚克隆;基因定位突变中的第二条链的合成;通过置换合成法(replacement synthesis)对DNA探针进行标记。